降脂

一、实验目的

体脂，即身体脂肪含量，是评估人体健康与营养状况的核心指标之一，它不仅关乎体重管理，更与多种慢性疾病风险密切相关。人体脂肪可分为必需脂肪和储存脂肪，前者是维持正常生理功能所必需，后者则在能量储存、体温调节及器官保护中扮演关键角色。然而，体脂过多，尤其是内脏脂肪的堆积，已成为现代社会的突出健康问题。内脏脂肪活性高，会释放游离脂肪酸和炎症因子，显著增加胰岛素抵抗、2型糖尿病、心血管疾病及某些癌症的发病风险。秀丽隐杆线虫具有生命周期短、遗传资源丰富、关键信号通路与人类高度同源、实验操作与维护简单等优点，并且线虫可以将从细菌食物中获得的脂肪酸转化为甘油三酯储存在肠道，作为体内储存脂肪的主要形式。该测试项目评价样品对线虫体脂含量的影响，评价其降脂的功效。

二、建模原理

不需要建模处理。

三、实验方案

3.1 最大检测浓度摸索

①实验动物：同步化的L4期野生型N2线虫。

②实验分组：对照组、每个样品3个剂量组。

③实验方法：将L4期野生型N2线虫转移到按表1体系配制的96孔板中，在20 ℃、120 rpm条件下培养48 h以后，在倒置显微镜下观察并记录线虫是否存在大量死亡的现象。每组线虫数量不少于30条。

表1 MTC实验培养体系

3.2 样品对体脂含量的影响

①实验动物：同步化的L4期野生型N2线虫。

②实验分组：对照组、每个样品1个剂量组。

③实验方法：移取同步化的L4期野生型N2线虫到按表2体系配置的48孔板（每孔总体积500 μL）中。孔板中AMP的终浓度为100 μg/mL、5-FUdR的终浓度为75 μg/mL以及NA22的终浓度约为0.6（OD 570 nm），控制每孔200-300条线虫加入到孔板中，每组设置3个复孔。在20 ℃、120 rpm条件下培养至Day 3，收集并用PBST溶液清洗线虫。加入40%异丙醇溶液固定线虫，再使用60%油红O工作液以30 r/min进行体脂染色2 h，用PBST溶液以30 r/min清洗染液30 min后在显微镜上拍摄线虫图片，使用Image J软件量化并计算每条线虫的体脂含量。

表2 降脂实验培养体系

④检测指标：体脂含量。