业务咨询
运动健康
一、实验目的
运动作为一种进化过程中形成的基本功能,具有深远的历史渊源。我们通常用运动能力的高低来表征生物体的运动水平。运动能力作为一个多维度的概念,通常指个体在运动或身体活动中表现出的综合能力,主要包括了力量、耐力、速度、步态等多方面的素质,同时与心理状态、意志力等内在因素密切相关。这些因素共同作用,决定了个体在运动中的表现水平。此外,运动能力不仅反映了机体的生理功能状态,还在一定程度上揭示了个体的健康状况。人类的运动能力受多种因素的影响,例如生长和衰老、健康状况和维持整体健康的身体活动水平等。秀丽隐杆线虫具有生命周期短、遗传资源丰富、关键信号通路与人类高度同源、实验操作与维护简单等优点,并且运动是秀丽线虫的基本行为,以正弦波模式弯曲身体来产生推力,已成为研究运动领域的理想模型。该测试项目评价样品对线虫运动能力的影响,评价其改善运动健康的功效。
二、建模原理
不需要建模处理。
三、实验方案
3.1 最大检测浓度摸索
①实验动物:同步化的L4期野生型N2线虫。
②实验分组:对照组、每个样品3个剂量组。
③实验方法:将L4期野生型N2线虫转移到按表1体系配制的96孔板中,在20 ℃、120 rpm条件下培养48 h以后,在倒置显微镜下观察并记录线虫是否存在大量死亡的现象。每组线虫数量不少于30条。
表1 MTC实验培养体系
组别 | 浓度 | Vsample (μL) | VNA22 (μL) | V5-FUdR (μL) | VAMP (μL) | Vworms (μL) | VS Medium (μL) |
对照组 | 0 | 0 | 10 | 1.5 | 2 | 20 | 66.5 |
样品组 | a mg/mL | b | 10 | 1.5 | 2 | 20 | 66.5-b |
3.2 样品对运动能力的影响
①实验动物:同步化的L4期野生型N2线虫。
②实验分组:对照组、每个样品1个剂量组。
③实验方法:移取同步化的L4期野生型N2线虫到按表2体系配置的48孔板(每孔总体积500 μL)中。孔板中AMP的终浓度为100 μg/mL、5-FUdR的终浓度为75 μg/mL以及NA22的终浓度约为0.6(OD 570 nm),控制每孔200-300条线虫加入到孔板中,每组设置3个复孔。在20 ℃、120 rpm条件下培养至第10天,收集并清洗线虫。移取20 μL虫液滴于预先准备好的3.5 cm NGM板上,录制30 s线虫爬行分析视频,再重新移取50 μL虫液(大概5-10条线虫),滴于载玻片上,录制30 s游动分析视频。采用Matlab、Image J和用Tierpsy Tracker等软件量化获取线虫的平均爬行速度、游动速度、身体摆动频率等指标。
表2 运动能力实验培养体系
组别 | 浓度 | Vsample (μL) | VNA22 (μL) | V5-FUdR (μL) | VAMP (μL) | Vworms (μL) | VS Medium (μL) |
对照组 | 0 | 0 | 50 | 7.5 | 10 | 100 | 332.5 |
样品组 | x mg/mL | y | 50 | 7.5 | 10 | 100 | 332.5-y |
④检测指标:平均爬行速度、游动速度、身体摆动频率等。
