耐缺氧

1. 建模原理

u化学缺氧法:

叠氮化钠(NaN₃)处理:通过水体添加NaN₃抑制线粒体细胞色素氧化酶,模拟细胞内缺氧(化学性缺氧)。

氯化钴(CoCl₂)处理:Co²⁺可稳定HIF-1α蛋白,诱导缺氧模拟信号,常用于研究HIF通路激活效应。

u基因编辑模型:

敲除HIF-1αVEGF基因,构建缺氧响应缺陷模型,用于验证药物对特定通路的调控作用。

 

2. 评价指标

u存活率与行为学指标

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u能量代谢

ATP含量:荧光素酶法检测组织ATP水平(缺氧导致线粒体功能障碍,ATP 减少)。

u缺氧应激标志物:

HIF-1α基因表达:RT-qPCR检测HIF-1α基因表达水平

VEGF-A基因表达:RT-qPCR检测血管生成因子mRNA水平(缺氧诱导VEGF上调)。

u氧化应激与凋亡:

ROS水平:DCFH-DA荧光探针标记,荧光显微镜检测。

Caspase-3活性:试剂盒检测细胞凋亡程度。


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