业务咨询
调节食欲
参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》
一、实验目的
验证受试样品对哺乳动物食欲的调节作用,通过正常动物食欲影响、食欲低下模型改善实验评估其功效。
二、实验动物选择
大鼠:SD或Wistar大鼠,180-220g,雄性,每组8-12只。
小鼠:ICR小鼠,18-22g,雄性,每组10-15只。
三、实验分组与剂量设计
组别 | 动物类型 | 剂量设置 | 样本量 | 处理周期 |
低剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量5倍(大鼠)/10倍(小鼠) | 8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠) | 14-30天 |
中剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量10倍(大鼠)/20 倍(小鼠) | 8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠) | 14-30天 |
高剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量15倍(不超过30倍) | 8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠) | 14-30天 |
模型对照组 | 大鼠/小鼠 | 溶剂(如生理盐水) | 8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠) | 14-30天 |
空白对照组 | 大鼠/小鼠 | 正常饲料+溶剂 | 8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠) | 14-30天 |
四、核心实验项目与方法
实验类型 | 操作要点 | 判定标准 |
正常动物食欲实验 | 1. 正常动物分组后,高剂量组灌胃受试样品14-30天,对照组给予溶剂; | 实验组与空白对照组摄食量、体重无显著差异(P≥0.05),表明对正常食欲无影响。 |
食欲低下模型实验 | 1. 模型建立:大鼠/小鼠灌胃复方地芬诺酯(2-4mg/kg)或洛哌丁胺,连续3天,诱导食欲低下; | ① 摄食量显著高于模型对照组(P≤0.05); |
五、关键操作步骤
u造模与给药:
模型制备:
复方地芬诺酯灌胃剂量:小鼠5mg/kg,大鼠10mg/kg,每日1次,连续3天,造模后筛选摄食量下降≥20%的动物。
受试样品灌胃体积:小鼠0.2mL/10g,大鼠1mL/100g,每日1次。
u指标检测:
摄食量:每日定量投喂饲料,记录剩余量,计算实际摄食量。
体重:每周称量1次,计算实验前后体重差值。
胃蛋白酶活性:处死动物后取胃组织,制备10%匀浆,采用福林-酚法测定活性(OD值换算为酶活性单位)。
小肠运动功能:灌胃墨汁溶液(含10%阿拉伯树胶+ 5%活性炭),25分钟后处死,测量墨汁推进长度。
六、数据采集与分析
u统计方法:
计量资料(体重、墨汁推进率等):方差齐性检验后用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s检验。
计数资料:χ²检验或秩和检验。
