调节食欲

参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》

 

一、实验目的

验证受试样品对哺乳动物食欲的调节作用,通过正常动物食欲影响、食欲低下模型改善实验评估其功效。

二、实验动物选择

大鼠:SDWistar大鼠,180-220g,雄性,每组8-12只。

小鼠:ICR小鼠,18-22g,雄性,每组10-15只。

三、实验分组与剂量设计

组别

动物类型

剂量设置

样本量

处理周期

低剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量5倍(大鼠)/10倍(小鼠)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

14-30

中剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量10倍(大鼠)/20 倍(小鼠)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

14-30

高剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量15倍(不超过30倍)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

14-30

模型对照组

大鼠/小鼠

溶剂(如生理盐水)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

14-30

空白对照组

大鼠/小鼠

正常饲料+溶剂

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

14-30

四、核心实验项目与方法

实验类型

操作要点

判定标准

正常动物食欲实验

1. 正常动物分组后,高剂量组灌胃受试样品14-30天,对照组给予溶剂;
2. 每日记录摄食量,计算平均日摄食量及体重变化。

实验组与空白对照组摄食量、体重无显著差异(P≥0.05),表明对正常食欲无影响。

食欲低下模型实验

1. 模型建立:大鼠/小鼠灌胃复方地芬诺酯(2-4mg/kg)或洛哌丁胺,连续3天,诱导食欲低下;
2. 造模后分组灌胃受试样品,连续14-30天;
3. 每日记录摄食量、体重,检测胃蛋白酶活性及小肠运动功能(墨汁推进率)。

摄食量显著高于模型对照组(P≤0.05);
体重增重显著高于模型对照组(P≤0.05);
胃蛋白酶活性或墨汁推进率显著改善(P≤0.05)。

、关键操作步骤

u造模与给药:

模型制备:

复方地芬诺酯灌胃剂量:小鼠5mg/kg,大鼠10mg/kg,每日1次,连续3天,造模后筛选摄食量下降≥20%的动物。

受试样品灌胃体积:小鼠0.2mL/10g,大鼠1mL/100g,每日1次。

u指标检测:

摄食量:每日定量投喂饲料,记录剩余量,计算实际摄食量。

体重:每周称量1次,计算实验前后体重差值。

胃蛋白酶活性:处死动物后取胃组织,制备10%匀浆,采用福林-酚法测定活性(OD值换算为酶活性单位)。

小肠运动功能:灌胃墨汁溶液(含10%阿拉伯树胶+ 5%活性炭),25分钟后处死,测量墨汁推进长度

、数据采集与分析

u统计方法:

计量资料(体重、墨汁推进率等):方差齐性检验后用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s检验。

计数资料:χ²检验或秩和检验。


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