业务咨询
肾保护
参考《保健食品功能检验与评价方法（2023 年版）》
一、实验目的
验证受试样品对哺乳动物（大鼠/小鼠）肾脏的保护作用，通过正常动物肾功能对照、肾损伤模型修复及相关生化指标评估其对肾脏的保护功效。
二、实验动物选择
1. 模型动物：
大鼠：SD或Wistar大鼠，180-220g，雄性，每组8-12只。
小鼠：成年小鼠（如ICR），26±2g，雄性，每组10-15只。
三、实验分组与剂量设计
组别 | 动物类型 | 剂量设置 | 样本量 | 处理周期 |
空白对照组 | 大鼠/小鼠 | 生理盐水/溶剂 | 8-15只 | 30-45天 |
模型对照组 | 大鼠/小鼠 | 溶剂（如生理盐水） | 8-15只 | 30-45天 |
低剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量5倍（大鼠）/10倍（小鼠） | 8-12只 | 30-45天 |
中剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量10倍（大鼠）/20倍（小鼠） | 8-12只 | 30-45天 |
高剂量组 | 大鼠/小鼠 | 人体推荐量15倍（不超过30倍） | 8-12只 | 30-45天 |
四、核心实验项目与方法
检测维度 | 实验项目 | 操作要点 | 判定标准 |
肾功能指标 | 血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN） | 禁食12h后采血，全自动生化仪检测。 | 实验组Scr、BUN显著低于模型对照组（P≤0.05）。 |
尿微量白蛋白（mAlb） | 收集24h尿液，酶联免疫法（ELISA）检测。 | mAlb水平显著降低（P≤0.05）。 | |
肾损伤病理 | 肾组织HE/PAS 染色 | 取肾组织固定、切片，镜检肾小球炎症、肾小管坏死程度，按病理评分标准分级。 | 病理评分显著低于模型对照组（P≤0.05）。 |
氧化应激 | 肾组织MDA含量 | 肾皮质匀浆后，硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化产物。 | MDA含量显著降低（P≤0.05）。 |
肾组织SOD活性 | 黄嘌呤氧化酶法测定抗氧化酶活性。 | SOD活性显著升高（P≤0.05）。 | |
急性肾损伤模型 | 顺铂诱导肾损伤（方案一） | 大鼠腹腔注射顺铂5-8mg/kg，小鼠 6-10mg/kg，造模后筛选 Scr 升高≥50% 动物，灌胃给药30天。 | 同 “肾功能指标” 及 “氧化应激” 判定标准。 |
慢性肾损伤模型 | 高嘌呤饮食诱导（方案二） | 大鼠喂食含1.2%腺嘌呤饲料4周，造模后灌胃给药45天，检测肾功能及病理。 | 同 “肾功能指标” 及 “肾损伤病理” 判定标准。 |
五、数据采集与分析
u统计方法：
计量资料：先进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析（ANOVA），组间比较用Dunnett’s检验；若数据非正态或方差不齐，进行对数转换或采用秩和检验（如 Kruskal-Wallis 检验）。
计数资料（如有效率）：采用χ²检验，若总例数< 40或理论数≤1，改用Fisher确切概率法。
