有助于消化

参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》

保健食品功能检验与评价方法(完整).pdf 

一、实验目的

验证受试样品对哺乳动物(大鼠/小鼠)消化功能的调节作用,通过体重、小肠运动、消化酶活性等指标评估其助消化功效。

二、实验动物选择

大鼠:WistarSD大鼠,160-200g,雄性优先,每组8-12只。

小鼠:近交系小鼠(如ICR),18-22g,雄性优先,每组10-15只。

三、实验分组与剂量设计

组别

动物类型

剂量

样本量

处理周期

低剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量5倍(大鼠)/10 倍(小鼠)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

30天(可延长至 45天)

中剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量10倍(大鼠)/20倍(小鼠)

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

30天(可延长至 45天)

高剂量组

大鼠/小鼠

人体推荐量15倍(不超过上限)

8-12 只(大鼠)/10-15只(小鼠)

30天(可延长至 45天)

阴性对照组

大鼠/小鼠

生理盐水/溶剂

8-12只(大鼠)/10-15只(小鼠)

30天(可延长至 45天)

四、核心检测指标与方法

检测维度

实验项目

操作要点

判定标准

体重与摄食

体重、体重增重、摄食量、食物利用率

1. 每周称量体重2次,记录摄食量;
2. 计算食物利用率(体重增重/摄食量 ×100%)。

实验组体重、体重增重、摄食量任一指标显著高于对照组(P≤0.05),且食物利用率不降低。

小肠运动

墨汁推进率实验

1. 禁食16h后灌胃墨汁(含5%活性炭);
2. 25min后处死,测量小肠总长度及墨汁推进长度,计算推进率。

实验组墨汁推进率显著高于模型对照组(P≤0.05),模型对照组需用复方地芬诺酯造模。

消化酶活性

胃蛋白酶活性、胃液量测定

1. 幽门结扎法收集胃液;
2. 比色法测定胃蛋白酶活性(单位:μ/mL)及胃液分泌量。

胃蛋白酶活性或胃液量显著高于对照组(P≤0.05)。

五、关键操作步骤

u墨汁推进率实验:

模型对照组灌胃复方地芬诺酯(5mg/kg BW)抑制小肠运动,实验组同步给予受试样品。

u胃蛋白酶活性测定:

取胃液与蛋白管孵育,测量透明部分长度,计算活性。

五、数据采集与分析

u统计方法:

计量资料(体重、墨汁推进率等):方差齐性检验后用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s检验。

计数资料:χ²检验或秩和检验。

u结果判定:

动物实验阳性需满足以下任一项:

动物实验阳性需满足以下任一项:

1. 体重/摄食+小肠运动:

实验组体重、体重增重、摄食量中至少一项显著高于阴性对照组(P≤0.05),且墨汁推进率显著高于模型对照组(P≤0.05,模型对照组需用复方地芬诺酯或洛哌丁胺造模成功)。

2. 体重/摄食+消化酶:

实验组体重、体重增重、摄食量中至少一项显著高于阴性对照组(P≤0.05),且胃蛋白酶活性或胃液量显著高于阴性对照组(P≤0.05)。

3. 小肠运动+消化酶:

墨汁推进率显著高于模型对照组(P≤0.05),且胃蛋白酶活性或胃液量显著高于阴性对照组(P≤0.05)。


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