耐缺氧

参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》

耐缺氧.pdf 

一、实验目的

验证受试样品对哺乳动物(小鼠)耐缺氧能力的提升作用,通过常压缺氧、化学性缺氧及脑缺血性缺氧模型评估其耐缺氧功效。

二、实验动物选择

   动物类型:近交系成年小鼠(如ICRBALB/c),单一性别(雄性优先),体重18-22g,每组10-15只。


三、实验分组与剂量设计

组别

剂量

样本量

处理周期

低剂量组

人体推荐量 10

10-15

30 天(可延长至 45 天)

中剂量组

人体推荐量 20

10-15

30 天(可延长至 45 天)

高剂量组

人体推荐量 30

10-15

30 天(可延长至 45 天)

阴性对照组

生理盐水 / 溶剂

10-15

30 天(可延长至 45 天)

阳性对照组

已知耐缺氧药物(如红景天提取物)

10-15

30 天(可延长至 45 天)

四、核心检测指标与方法

实验类型

操作要点

判定标准

常压耐缺氧实验

1. 末次灌胃后1小时,将小鼠放入盛有5g钠石灰的250mL磨口瓶,凡士林密封瓶口;
2. 记录小鼠从密封至呼吸停止的存活时间。

实验组存活时间显著长于对照组(P≤0.05)。

亚硝酸钠中毒存活实验

1. 末次灌胃后1小时,腹腔注射200-240mg/kg BW亚硝酸钠(0.1mL/10g);
2. 记录注射后至死亡的存活时间。

实验组存活时间显著长于对照组(P≤0.05)。

急性脑缺血性缺氧实验

1. 末次灌胃后1小时,颈椎脱臼快速断头,记录断头后张口喘气停止时间;
2. 操作需锋利剪刀,避免损伤延脑。

实验组喘气时间显著长于对照组(P≤0.05)。

、数据处理与结果判定

u统计方法:

计量资料(如OD值、重量差):先进行方差齐性检验,若满足条件用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s检验;否则用秩和检验。

计数资料(如吞噬率):用χ²检验或 Fisher确切概率法。

u结果判定:

三项实验中任意两项结果阳性,即可判定受试样品具有耐缺氧作用。


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