辅助润肠通便

参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》

润肠通便.pdf 

一、实验目的

验证受试样品对哺乳动物肠道蠕动功能的改善作用,通过便秘模型观察小肠运动、排便时间及粪便指标变化。

二、实验动物选择

品种:成年雄性小鼠,体重18-22g,每组10-15只。

环境:屏障系统饲养,温度(20-25℃),湿度(50%-60%),12小时昼夜节律。

三、实验分组与剂量设计

组别

剂量设计

样本量

处理周期

低剂量组

人体推荐量10+造模药物

10-15

7-15

中剂量组

人体推荐量20+造模药物

10-15

7-15

高剂量组

人体推荐量30+造模药物

10-15

7-15

模型对照组

造模药物+溶剂灌胃

10-15

7-15

阴性对照组

溶剂灌胃

10-15

7-15

四、核心检测指标与方法

检测维度

实验项目

操作要点

判定标准

小肠运动功能

墨汁推进率

1. 造模后灌胃墨汁(含5%活性炭+10% 阿拉伯树胶);
2. 25分钟后处死动物,测量小肠总长度及墨汁推进长度。

受试组推进率显著高于模型对照组(P≤0.05)。

排便功能

首粒排黑便时间

1. 灌胃墨汁后记录首粒黑便排出时间;
2. 单笼饲养,避免干扰。

受试组时间显著短于模型对照组(P≤0.05)。

5-6小时排便粒数/重量

1. 收集5-6小时内粪便,计数粒数并称重;
2. 粪便需剔除首粒前的残留便。

受试组粒数/重量显著高于模型对照组(P≤0.05)。

粪便性状

感官评分

按布里斯托分类法评估粪便硬度(I级为正常软便,III级为硬结便)。

受试组粪便性状改善至I-II级比例显著高于模型对照组。

五、关键操作步骤

u模型建立:

造模药物:复方地芬诺酯(5mg/kg BW)或洛哌丁胺(2-4mg/kg BW),灌胃0.5小时后建立便秘模型。

禁食处理:实验前禁食不禁水16小时,确保肠道排空。

u墨汁推进实验:

墨汁配制:阿拉伯树胶100g +活性炭50g,加水定容至1000mL,煮沸三次后4℃保存。

测量要求:小肠拉成直线,避免拉伸变形,精确测量幽门至墨汁前沿距离。

u排便指标监测:

单笼饲养:灌墨汁后单笼观察,记录首粒黑便时间及后续5-6小时内排便情况。

避免污染:及时清除非黑便粪便,确保数据准确性。

、数据采集与分析

u统计方法:

计量资料(体重、墨汁推进率等):方差齐性检验后用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s检验。

计数资料:χ²检验或秩和检验。

u结果判定:

受试组墨汁推进率显著升高,且首粒排便时间缩短、粪便粒数/重量增加,任意两项指标阳性(P≤0.05)。

粪便性状改善与上述指标结合判定。


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