有助于维持血压健康水平

参考《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》

有助于维持血压.pdf 

一、实验目的

通过动物实验,验证受试样品对哺乳动物(大鼠)血压的调节作用,评估其是否具有维持血压健康水平的功效。

二、实验动物选择

1. 模型动物:

自发高血压大鼠(SHR):首选10-12周龄,体重180-220克,雌雄兼用,每组8-12只。

肾血管型高血压大鼠:次选,通过手术制备 两肾一夹模型(银夹内径0.20-0.25mm),术后30天筛选血压≥21.3kPa160mmHg)且稳定的个体。

2. 正常对照动物:健康WistarSD大鼠,年龄、体重与模型组匹配。

三、实验分组与剂量设计

组别

动物类型

受试样品剂量

样本量

对照处理

低剂量组

SHR 或肾血管型大鼠

人体推荐量的 5

8-12

等体积溶剂灌胃

中剂量组

SHR 或肾血管型大鼠

人体推荐量的 10

8-12

等体积溶剂灌胃

高剂量组

SHR 或肾血管型大鼠

人体推荐量的 15

8-12

等体积溶剂灌胃

阴性对照组

SHR 或肾血管型大鼠

溶剂(如生理盐水)

8-12

等体积溶剂灌胃

正常高剂量组

正常 Wistar/SD 大鼠

受试样品高剂量

8-12

等体积溶剂灌胃

阳性对照组

SHR 或肾血管型大鼠

已知降压药物(如卡托普利)

8-12

按临床等效剂量给药

注:必要时设置阳性对照组(如验证药物类受试样品),给药周期30天,可延长至45天。

四、关键操作步骤

u模型制备(仅肾血管型高血压大鼠):

手术夹持左肾动脉,术后30天测量血压,筛选符合标准(血压≥160mmHg 或较术前升高 4kPa)的大鼠。

u适应期:

实验前1周对所有动物进行多次血压测量,使其适应测压环境(室温保持25℃,鼠尾套袖固定于根部,恒温盒保温)。

u给药与监测:

每日定时灌胃受试样品或对照物,每周测量1-2次血压和心率(需在动物清醒、安静状态下测定,避免应激反应)。

停止给药后,继续观察7-14天或至血压恢复至对照组水平。

五、数据采集与分析

u测量方法:

采用尾脉搏法(无创性小动物血压测定仪),套袖充气速度20-30mmHg/s,记录连续3 次读数(心率变化≤10/分、血压变化≤6mmHg),取平均值。

u统计方法:

先进行方差齐性检验,若方差齐,采用单因素方差分析(ANOVA),组间比较用Dunnett’s 检验(与阴性对照组比较);若数据非正态或方差不齐,经变量转换后再分析,仍不满足则用秩和检验(如Kruskal-Wallis 检验)。

u结果判定:

实验组血压显著低于阴性对照组(P≤0.05),且对心率无显著影响,同时正常高剂量组血压无异常变化,可判定受试样品有效。


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